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065316金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PBS緩沖液配制問(wèn)題
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| 本人菜鳥,詢問(wèn)有關(guān)PB、PBS緩沖液的區(qū)別?另外就是PBS緩沖液中,什么時(shí)候加NaCl、KCl,網(wǎng)上好多配方哦,都搞糊涂了。各位兄弟姐妹,求助啊! |
PBS緩沖溶液配制 |
木蟲 (正式寫手)
新蟲 (初入文壇)
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PB和PBS是免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)中最為常用的緩沖液, 0.01mol/L的PBS主要用于漂洗組織標(biāo)本、稀釋血清等,其pH應(yīng)在7.25~7.35之間,否則需要調(diào)整。 0.1mol/L的PB常用于配制固定液、蔗糖等。 一般情況下,0.2mol/l PB的pH值稍高些,稀釋成0.01mol/L的PBS時(shí),?蛇_(dá)到要求的pH值,若需調(diào)整pH,通常也是調(diào)PB的pH。 配制方法為: 1.0.2mol/L(pH7.4)磷酸鹽緩沖液(Phosphate Buffer, PB) 試劑: NaH2PO4•2H2O Na2HPO4•12H2O 配制方法:配制時(shí),常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,兩者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液(PB),根據(jù)需要可配制不同濃度的PB和PBS。 。1)0.2mol/L的 Na2HPO4;稱取Na2HPO4.12H2o 31.2g(或 NaH2PO4•H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。 。2)0.2mol/L的 Na2HPO4:稱取NaHPO4.•12H2o 71.632g(或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2o 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。 (3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O,充分混合即為0.2mol/L的PB(pH約為7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通過(guò)改變二者的比例來(lái)加以調(diào)整,室溫保存即可。 2.0.01mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水(Phosphate Buffered Saline, PBS) 試劑:0.2mol/L PB 50ml NaCl 8.5~9g(約0.15mol/L) 重蒸水 至1000ml 配制方法:稱取NaCl 8.5~9g及0.2mol/L的PB 50ml,加入1000ml的容量瓶中,最后加重蒸水至1000ml,充分搖勻即可。若擬配制0.02mol/L的PBS,則PB量加倍即可,依此類推 |
銅蟲 (初入文壇)
金蟲 (小有名氣)
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