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sky_x1227鐵蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
蛋白結(jié)晶出現(xiàn)疑似晶體結(jié)構(gòu)，后續(xù)該如何優(yōu)化檢測(cè) 已有5人參與
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大家好，我近期做蛋白結(jié)晶，最近得到了好多疑似的結(jié)果，有的很像結(jié)晶，我不知道后續(xù)該怎么優(yōu)化檢測(cè)之類(lèi)的，有人說(shuō)結(jié)晶種類(lèi)多有可能是緩沖體系中的鹽結(jié)晶了，這個(gè)怎么驗(yàn)證呢，一般做蛋白結(jié)晶都是怎么確定它是不是你想要的那種結(jié)果呢，求高人指點(diǎn)。附件只是其中的兩種結(jié)果。 IMG_20140316_083749.jpg IMG_20140316_083756.jpg IMG_20140316_085123.jpg IMG_20140316_085127.jpg |
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 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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Loop是專(zhuān)門(mén)撈晶體的工具，是一個(gè)大約0.05mm-0.4mm的尼龍環(huán)。 你先在EP管口加大約20微升結(jié)晶池液，然后將晶體撈進(jìn)去，隨后將液滴順到EP管底，然后4000轉(zhuǎn)離心5分鐘，小心的吸去上清液，注意不要碰到晶體。 接下來(lái)再加入20微升結(jié)晶池液，離心，吸去上清液。反復(fù)幾次，算是洗晶體。每次清洗液都要留著作對(duì)照。 最后你覺(jué)得差不多洗干凈了，就把晶體融了，然后跑膠。 如果清洗液沒(méi)有條帶，而晶體樣有條帶，說(shuō)明晶體是蛋白晶。 希望對(duì)你有幫助。 |
4樓2014-03-18 10:31:01
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