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biosun1988新蟲 (初入文壇)
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[求助]
加蛋白loading buffer后溶液呈黃色而不是藍(lán)色,是怎么回事兒? 已有2人參與
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提取細(xì)胞蛋白做western, 抗體IP后加蛋白loading buffer,結(jié)果溶液呈現(xiàn)黃色 .input加buffer后是正常的藍(lán)色.這樣是否可以繼續(xù)電泳,或者有什么辦法可以調(diào)回藍(lán)色.另外,在-20C凍存后有的樣品變成藍(lán)色,拿出來煮沸后全部變成黃色,請(qǐng)問各位大俠這是怎么回事兒. |
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biosun1988
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7樓2014-03-25 20:54:23
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
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biosun1988: 金幣+5, ★★★很有幫助, 解釋了問題的原因,很有幫助. 2014-03-25 20:51:25
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biosun1988: 金幣+5, ★★★很有幫助, 解釋了問題的原因,很有幫助. 2014-03-25 20:51:25
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你的樣品太酸了 溴酚藍(lán)在pH低于3時(shí)會(huì)變黃 檢查一下你樣品的buffer 如果就只能這樣，一定要用pH 6.8的Tris把pH調(diào)回來，溴酚藍(lán)在大于4.6的時(shí)候就是藍(lán)色的了，所以你可能需要多加一點(diǎn)Tirs。 不然的話，不連續(xù)SDS-PAGE濃縮分離完全依賴于pH，可能有影響。 |
2樓2014-03-25 19:30:09
biosun1988
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3樓2014-03-25 20:13:56
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4樓2014-03-25 20:41:13
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