 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1810 | 回復(fù): 8 | |||
厚德求是木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
用試劑盒通過全質(zhì)粒PCR來做定點(diǎn)突變，導(dǎo)入不了感受態(tài)細(xì)胞，請(qǐng)幫我走出困境！ 已有5人參與
|
|
先介紹一下我的試驗(yàn)情況： 就像題目所說，我的試驗(yàn)是對(duì)蛋白質(zhì)做定點(diǎn)突變，方法是設(shè)計(jì)突變引物，用全質(zhì)粒作為模板，在突變結(jié)束完成后用選擇性消化甲基化核酸的酶處理產(chǎn)物，然后利用熱擊法把核酸片段轉(zhuǎn)化導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞中。 現(xiàn)在的問題是，全質(zhì)粒PCR是挺成功的，模板條帶大小正確，明亮清晰�？墒怯迷噭┖刑峁┑母惺軕B(tài)細(xì)胞做轉(zhuǎn)化，就長(zhǎng)不出單菌落，而是一大片薄薄的云霧一樣的東西，師兄說不對(duì)勁，可能失敗了�？墒俏乙呀�(jīng)重復(fù)了3次了，每次都是這種類似的情況！所以我想，是不是他的感受態(tài)有問題，現(xiàn)在想自己制備DH5α感受態(tài)細(xì)胞，把目標(biāo)質(zhì)粒導(dǎo)入這個(gè)感受態(tài)細(xì)胞，在它里面完成超螺旋的裝備，然后再導(dǎo)入我的目標(biāo)宿主中。 對(duì)了，我用的試劑盒是“TransGen”（貌似是北京的公司）的fast mutagenesis system，有沒有用過的朋友��？我覺得這個(gè)很不好用�。∈遣皇且獡Q試劑盒�。空�(qǐng)了解情況和有過類似經(jīng)歷的朋友幫我！先謝謝了！  |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有54人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
biostar2009
專家顧問 (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +220 - MolEPI: 20
- 應(yīng)助: 231 (大學(xué)生)
- 金幣: 10391.9
- 散金: 387
- 紅花: 63
- 帖子: 540
- 在線: 151.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2811882
- 注冊(cè): 2013-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 分子生物
2樓2014-03-31 20:43:45
厚德求是
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 41 (小學(xué)生)
- 金幣: 2270.6
- 散金: 1050
- 紅花: 3
- 帖子: 1208
- 在線: 107.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2418606
- 注冊(cè): 2013-04-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2014-03-31 20:52:49
biostar2009
專家顧問 (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +220 - MolEPI: 20
- 應(yīng)助: 231 (大學(xué)生)
- 金幣: 10391.9
- 散金: 387
- 紅花: 63
- 帖子: 540
- 在線: 151.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2811882
- 注冊(cè): 2013-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 分子生物
4樓2014-03-31 20:58:20
lihe131
至尊木蟲 (文壇精英)
- 應(yīng)助: 106 (高中生)
- 金幣: 12400.9
- 散金: 3690
- 紅花: 10
- 帖子: 14218
- 在線: 263.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 504554
- 注冊(cè): 2008-02-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
5樓2014-04-01 17:04:19
zk0604
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2423.9
- 散金: 400
- 紅花: 6
- 帖子: 393
- 在線: 356.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1339088
- 注冊(cè): 2011-07-06
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
6樓2014-04-01 17:54:47
隨風(fēng)飄搖11
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 92 (初中生)
- 金幣: 2284.9
- 散金: 606
- 紅花: 53
- 帖子: 2249
- 在線: 818.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1146270
- 注冊(cè): 2010-11-14
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
7樓2014-04-02 13:00:24
lxfstart
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 754.3
- 散金: 130
- 帖子: 63
- 在線: 93.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 2932234
- 注冊(cè): 2014-01-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 心腦血管藥物藥理
8樓2014-04-02 14:07:13
厚德求是
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 41 (小學(xué)生)
- 金幣: 2270.6
- 散金: 1050
- 紅花: 3
- 帖子: 1208
- 在線: 107.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2418606
- 注冊(cè): 2013-04-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
9樓2015-10-19 00:50:57
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 厚德求是 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | shansx 2026-03-22 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | Auroracx 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +5 | CX 330 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！
+3
|
酥酥魚.. 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
+4
|
2117205181 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名 +5 | 脫穎而出 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +7 | Tyoumou 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +4 | 我愛生物生物愛?/a> 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +3 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +12 | 梁梁校校 2026-03-19 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 22 350 本科985求調(diào)劑，求老登收留 +3 | 李軼男003 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +14 | chaojifeixia 2026-03-19 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 白QF 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +10 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑（有工作經(jīng)驗(yàn)） +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學(xué)）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩318求調(diào)劑 +5 | February_Feb 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
|