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鬼羽帝魂木蟲 (著名寫手)
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[求助]
求助：酶切的疑惑 已有3人參與
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最近做酶切，老是切不好，求幫助。 （1）回收不到東西：圖1是回收之前的帶。圖2是回收之后的帶，已經(jīng)彌散。 （2）做轉(zhuǎn)化鑒定，發(fā)現(xiàn)原來質(zhì)粒未酶切完全。但是回收后的條帶有稍微的彌散，這是什么原因？如圖3. （3）圖4中圓圈指示的區(qū)域是什么？是彌散的還是。。。。？？ 望解答。急求。 圖1 圖2 圖3 圖4 |
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d00614028
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4樓2014-04-05 10:56:31
d00614028
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【答案】應(yīng)助回帖
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1. 回收不到東西： 看看你的TAE的pH值是否正確，我們實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)有一次TAE 的PH值不正確導(dǎo)致回收不了DNA。另外你膠回收的洗脫液用的是什么，是水么？洗脫液的PH好像要在8左右，保持堿性，要不然洗脫不下來。 2. 未酶切完全，回收回來的可能就有質(zhì)粒，你那彌散可能就是質(zhì)粒。 3. 你圈的東西是不是因?yàn)榕苣z的問題導(dǎo)致的呢，看你膠配的不是很好，另外，給個(gè)建議，不要用這么大的孔來跑，我覺得這樣會(huì)導(dǎo)致彌散嚴(yán)重，建議用正常的膠回收孔來跑（個(gè)人建議）。 希望對(duì)你有幫助。 |
2樓2014-04-05 10:01:41
鬼羽帝魂
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3樓2014-04-05 10:19:57
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5樓2014-04-05 19:52:14
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