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cas9/talen基因敲除
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完美基因靶向操作: 識(shí)別特異DNA序列的蛋白+操作DNA的酶 talen技術(shù)原理:TALEN兩部分組成:識(shí)別特異DNA序列的TALE和內(nèi)切酶FOKI 。細(xì)胞內(nèi)基因組DNA被TALEN剪切后,誘發(fā)DNA損傷修復(fù)機(jī)制。細(xì)胞可以通過NHEJ(Non-homologous End Joining)修復(fù)DNA,在此修過程中或多或少地刪除或插入了一定數(shù)目的堿基,造成移碼,形成目標(biāo)基因敲除突變體。 TALEN敲除基因的效率大約為20%,從1%-30%。 最好的TALEN達(dá)50% cas9技術(shù)原理:(CRISPR)/Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌一種不斷進(jìn)化適應(yīng)的免疫防御機(jī)制。CRISPR/Cas9利用一段小 RNA 來(lái)識(shí)別并進(jìn)行有效的靶向DNA剪切。 |
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