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飄逸的云新蟲 (小有名氣)
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[求助]
釀酒酵母載體PYES2/ct的誘導(dǎo)問題 已有1人參與
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請問有人用過PYES2/CT這個(gè)載體嗎？本人連了一個(gè)基因在這個(gè)載體上，轉(zhuǎn)進(jìn)了宿主BY4742中，用半乳糖誘導(dǎo)了幾次，一直誘導(dǎo)不出來。請問有沒有成功構(gòu)建過這套系統(tǒng)的大神啊，能否交流一下啊 |
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20081118129
新蟲 (著名寫手)
Drake
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3樓2016-11-12 15:48:11
jiaoxiayoulu
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【答案】應(yīng)助回帖
| 我也準(zhǔn)備用這個(gè)載體做酵母基因過表達(dá)！現(xiàn)在也還是在查資料階段：有個(gè)細(xì)節(jié)要注意，轉(zhuǎn)化之后培養(yǎng)基中不能有葡萄糖哦，要用棉籽糖代替，培養(yǎng)至對數(shù)期初期之后才用半乳糖誘導(dǎo)表達(dá)的！【Overexpression of eIF4E in Saccharomyces cerevisiae Causes SlowGrowth and Decreased -Factor Response through Alterations in CLN3 Expression*】看看這篇文獻(xiàn)吧 |
2樓2014-06-23 10:01:35
20081118129
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4樓2016-11-12 15:49:10
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