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飄逸的云新蟲 (小有名氣)
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[求助]
釀酒酵母載體PYES2/ct的誘導(dǎo)問題 已有1人參與
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請問有人用過PYES2/CT這個載體嗎?本人連了一個基因在這個載體上,轉(zhuǎn)進了宿主BY4742中,用半乳糖誘導(dǎo)了幾次,一直誘導(dǎo)不出來。請問有沒有成功構(gòu)建過這套系統(tǒng)的大神啊,能否交流一下啊![]() |
新蟲 (著名寫手)
Drake
新蟲 (小有名氣)
| 我也準(zhǔn)備用這個載體做酵母基因過表達!現(xiàn)在也還是在查資料階段:有個細節(jié)要注意,轉(zhuǎn)化之后培養(yǎng)基中不能有葡萄糖哦,要用棉籽糖代替,培養(yǎng)至對數(shù)期初期之后才用半乳糖誘導(dǎo)表達的!【Overexpression of eIF4E in Saccharomyces cerevisiae Causes SlowGrowth and Decreased -Factor Response through Alterations in CLN3 Expression*】看看這篇文獻吧 |
新蟲 (著名寫手)
Drake
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