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gao1261987金蟲 (小有名氣)
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色譜柱用一段時(shí)間柱效降低 已有2人參與
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| 色譜柱用過一段時(shí)間之后柱效明顯降低，拖尾因子也大很多，怎么回事？柱子用的時(shí)間也沒有很長(zhǎng)，不過因?yàn)椴蓸訒r(shí)間不是很短，會(huì)在下班后繼續(xù)采樣并且設(shè)置程序沖洗柱子，這樣會(huì)對(duì)柱子有影響嗎？還有，想問下，保存色譜柱的溶劑有限制嗎？甲醇乙腈都可以吧？ |
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柱效降低伴隨拖尾，有幾種可能。一是流動(dòng)相pH過高或過低（超出2.5~6的范圍），導(dǎo)致色譜柱填料劣化，一般進(jìn)樣兩百針以內(nèi)就會(huì)有明顯的變化（正常壽命2000~3000針）；而是疏水塌陷，由過低有機(jī)相比例的水溶液保存導(dǎo)致；其三，色譜柱部分堵塞或填料污染，導(dǎo)致柱內(nèi)流體行為發(fā)生變化，通常伴隨反壓升高，較容易判斷，可以用反沖、更換柱頭填料來修復(fù)；其四也是較壞的一種可能，C18流失，硅羥基增多。這主要是應(yīng)為在C18柱上長(zhǎng)時(shí)間使用過強(qiáng)的溶劑造成，比如乙酸乙酯和四氫呋喃。另外也可能由于使用乙腈或異丙醇長(zhǎng)時(shí)間保存色譜柱導(dǎo)致。 設(shè)置自動(dòng)沖柱程序，有幾個(gè)經(jīng)驗(yàn)分享：1.在程序的最后，逐步減小流速，避免對(duì)色譜柱機(jī)械性損傷。2. 沖柱期間保持柱溫，以便雜質(zhì)和緩沖鹽更快洗脫，有必要時(shí)可適當(dāng)升高柱溫。3.使用甲醇或乙腈沖洗干凈后，沒必要一定使用純有機(jī)相保存色譜柱，可按說明書上色譜柱封存條件進(jìn)行保存。4.如果分析時(shí)是使用梯度程序，或已保證沖出全部雜質(zhì)成分，且一周內(nèi)還要繼續(xù)使用，不一定必須要使用純有機(jī)相進(jìn)行沖洗。5.色譜柱的保存，色譜柱兩端的密封性比沖洗的干凈程度更重要。 |
9樓2014-04-16 16:28:27
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