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xyjk11木蟲 (初入文壇)
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[求助]
pEGFP-C1載體上連接目的基因，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后48小時(shí)可以用WB直接檢測(cè)幾個(gè)蛋白表達(dá)量嗎 已有2人參與
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| 我在pEGFP-C1載體上連接目的基因，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后48小時(shí)后。熒光顯微鏡下觀察到空載體和構(gòu)建的載體均有大量熒光，可以直接進(jìn)行RT-PCR和WB檢測(cè)其中幾個(gè)蛋白的表達(dá)量嗎，想通過WB觀察轉(zhuǎn)染進(jìn)去高表達(dá)目的蛋白對(duì)其他幾個(gè)蛋白的影響。有人說要進(jìn)行篩選，得到穩(wěn)定的細(xì)胞株才能檢測(cè)，但是有人說可以直接轉(zhuǎn)染48小時(shí)檢測(cè)，這難道就是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別嗎，但是我只想通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染來說明問題，穩(wěn)定篩選時(shí)間太長，如果熒光顯微鏡下證實(shí)轉(zhuǎn)染效率大于60%。就可以通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染證明嗎，期待大家?guī)兔鉀Q這個(gè)疑惑，謝謝��！ |
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for5
木蟲 (正式寫手)
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2樓2014-04-17 16:32:15
xyjk11
木蟲 (初入文壇)
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3樓2014-04-17 16:34:27
4樓2014-04-23 18:49:01
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