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提取肉中微生物基因組用什么方法好？用試劑盒的話，什么試劑盒好？ 已有2人參與
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| 提取肉中微生物基因組用什么方法好？用試劑盒的話，什么試劑盒好？ |
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xiaoamuchong
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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勻漿法 10g碎肉樣于80mL滅菌離心管中，加入30mL滅菌生理鹽水，冰浴條件下用高速勻漿器6500r/min勻漿30s[10]，將肉樣轉(zhuǎn)移入滅菌錐形瓶中，繼續(xù)加入60mL滅菌生理鹽水，輕輕搖勻，靜置5min。所得的混濁液200×g離心1min，取15mL上清液，12000 × g離心5min。 細(xì)菌DNA提取 采用細(xì)菌DNA提取試劑盒，方法稍作調(diào)整。上述離心所得沉淀，加入200μL Buffer S懸浮，加入20μL溶菌酶(50mg/mL)，混勻，37℃孵育1h，加入30μL蛋白酶K(20mg/mL)，混勻，55℃孵育2～3h，然后繼續(xù)按試劑盒操作說明進(jìn)行。提取的DNA溶于80μL的TE緩沖液，1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測后，－20℃凍存。 可參考：巢氏pcr---冷卻豬肉不同前處理對細(xì)菌DNA提取及PCR_DGGE的影響 作者：江 蕓 |
2樓2014-04-20 14:53:13
3樓2014-04-22 08:58:52
quiller2000
木蟲 (著名寫手)
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4樓2014-04-23 00:11:32
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