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fenheyue銀蟲 (小有名氣)
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DNA不溶解怎么辦? 已有9人參與
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| 各位大俠好,半個月前我收到國外寄過來的DNA樣品,是用乙酸鈉和乙醇沉淀的。我離心后放在通風(fēng)廚里晾干了2個小時,然后用dd水溶解,可是都融了半個月了,還有很多DNA沒有溶解,我該怎么辦呢???我曾試過53°加熱促進(jìn)溶解,但是基本上沒有效果。 |
分子生物學(xué)技術(shù) |

專家顧問 (正式寫手)
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專家經(jīng)驗: +220 |
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吃過藕粉沒? 或者你試過把a(bǔ)garose粉末加到熱水,或者已經(jīng)煮化的膠里面么? 這種agarose,哪怕你煮上七七四十九天,也不見得溶解 這就是為什么過干的核酸不利于溶解的一個類似現(xiàn)象 核酸作為多聚物,你讓它干透了,再加水,外面的一層溶解了,但是作為多聚物,又離不開那一團(tuán),不離開,里面的又接觸不到水,何談溶解? agarose粉末直接到熱水,外面的一層很快溶解糊化,形成一層防水層,里面的再也接觸不到水了 而在冷水里面,水還有時間滲透到顆粒里面的,這樣就可以都溶解了。 所以你這個情況提高鹽濃度估計難以奏效。 我建議你加點堿試試,把NaOH的終濃度加到8 mM,8 mM的NaOH pH~9,不影響DNA的穩(wěn)定性。溶解之后也很容易用Tris或者HEPES buffer調(diào)回來。 堿性環(huán)境有利于DNA溶解,相當(dāng)于提高了溶解度。 另外,很有效的一個方法,物理破壞,你用槍頭去戳那段沉淀,盡量把它搞小,增加接觸面積。 |
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