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IP后WB,蛋白比預期的大,正反拉蛋白都做了,都是大十幾kD 已有4人參與
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最近在苦一個圖,所以做了個ChIP,然后用我的目標蛋白(蛋白A)做WB,結果發(fā)現(xiàn)雜出來的帶比蛋白A的理論大小大十幾kD。 我們懷疑可能是非特異性條帶的結合,于是嘗試用蛋白A做CO-IP,然后用ChIP的抗體做WB,發(fā)現(xiàn)雜出來的帶也比預計的大十幾kD。 現(xiàn)在懷疑可能情況有一下幾種: 1.發(fā)生了什么修飾 造成蛋白變大 2.結合了其他分子 但是由于WB是變性的 所以這一點上我們持有懷疑意見 3.非特異性結合 這一點上急需方法來排除,希望高手可以指教一下 我們實驗室一直做RNA相關實驗,最近才開始摸索Chromatin相關實驗,小菜鳥滿臉血跪求指教 OTZ |
蛋白質生物學實驗經(jīng)驗 | 核酸生物學實驗經(jīng)驗 | 細胞生物學實驗經(jīng)驗 |
銀蟲 (正式寫手)

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至尊木蟲 (文壇精英)
木蟲 (小有名氣)
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