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fMssop新蟲 (初入文壇)
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[求助]
金黃色葡萄球菌腸毒素SEC表達(dá) 已有1人參與
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| 現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室只有野生型金黃色葡萄球菌，想要表達(dá)腸毒素SEC，但是不清楚表達(dá)的最佳條件，以及后續(xù)如何分離提純SEC，求指教。 |
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3樓2014-05-01 07:30:16
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 使用胰酪胨綜合培養(yǎng)基,以搖瓶培養(yǎng)方式培養(yǎng)36～40h,可使除菌濾液中SEC達(dá)到較高量(33840ng/ml);用POST-FLO-Ⅱ型流動(dòng)循環(huán)超濾泵,以10000dalton超濾膜超濾截留濃縮。使SEC原液濃縮約10倍(336800ng/ml);再通過DEAE-纖維素柱層析使SEC純度達(dá)到46.1%。最后通過SephadexG-75分子篩過柱使SEC純度達(dá)到96.1%。 |
2樓2014-04-30 12:59:27
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4樓2014-05-05 09:39:23
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5樓2014-05-05 11:50:11
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