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~春夢秋云~金蟲 (小有名氣)
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[求助]
誰用過pEarleyGate 103做擬南芥的瞬時表達(dá)，這個載體好用嗎？ 已有1人參與
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| 本人準(zhǔn)備用這個載體做亞細(xì)胞定位，預(yù)測的位置在葉綠體上，請問有沒有人用過這個載體，提供一點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)?zāi)�，在此不勝感激！還有做這個怎么做陽性對照呢？ |
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8樓2017-01-01 10:26:57
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gyesang: 金幣+3, 鼓勵回帖交流！ 2014-05-07 00:27:36
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| 這個載體是35S啟動子加gateway系統(tǒng)，連接GFP和HIS標(biāo)簽，可以用western檢測蛋白表達(dá)。做瞬時表達(dá)亞細(xì)胞定位沒有問題。但由于是35S強(qiáng)啟動子，可能你需要注意目的蛋白過表達(dá)是否對正常定位尤其是葉綠體定位有影響，我沒有做過葉綠體相關(guān)蛋白，所以無法確定。至于陽性對照，葉綠體本身有自發(fā)熒光，>650 nm可以觀察到，拿這個可以做一個定位對照。 |
2樓2014-05-06 23:03:53
~春夢秋云~
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3樓2014-05-08 13:45:05
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5樓2014-05-08 19:02:00
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