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chenyuanli木蟲 (小有名氣)
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[求助]
凝膠色譜分離蛋白問題 已有1人參與
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大家好： 最近在用SEC-150分子篩分離血漿蛋白，該分子篩的分離范圍為500 - 150,000，目的蛋白分子量為180K，重要雜蛋白為66K和40K左右，我大概計(jì)算了一下柱體積約為14.3ml，柱床體積約為5.1ml，也就是說分離體積為9.2ml。理論上說，目的蛋白應(yīng)該在洗脫5.1ml時(shí)出現(xiàn)，而主要雜蛋白應(yīng)該在洗脫5.1ml之后的某時(shí)間點(diǎn)分別出現(xiàn)。但是問題出來了，總是在洗脫5.1ml之后出現(xiàn)一個(gè)大峰，調(diào)整了幾次流速，分別為0.35ml/min、0.5ml/min、1.0ml/min，流動(dòng)相為150mM磷酸鹽溶液。求大牛解釋。  |
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Davie_Meagen
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chenyuanli
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3樓2014-05-14 14:30:46
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