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wsf19850816

銀蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 354.4
帖子: 26
在線: 31.4小時
蟲號: 1985011
注冊: 2012-09-08
性別: GG
專業(yè): 生物化學(xué)

[求助] 請教競爭ELISA問題已有1人參與

我們在做針對特定蛋白A的單抗，已知蛋白A,B,C,D同源性很強(qiáng)，我們獲得高親和力的單抗細(xì)胞株1F3，在交叉反應(yīng)中，我們發(fā)現(xiàn)，在同時接觸ABCD，四種抗原的時候，抗體幾乎不和BCD反應(yīng)。交叉反應(yīng)我們使用的是競爭ELISA。

但是我們在做ABCD蛋白的western blot時候，發(fā)現(xiàn)我們的單抗和BCD都有反應(yīng)，且反應(yīng)強(qiáng)烈。

我們隨后用包被了ABCD抗原的ELISA直接檢測單抗對這四種包被抗原的親和力，發(fā)現(xiàn)，在同樣的抗體稀釋度下，單抗對四種抗原的親和力沒有明顯差異。

這就是我們的問題，貌似單抗可同時識別四種抗原，但是當(dāng)A與BCD同時存在的情況下，抗體只優(yōu)先于A反應(yīng)，從而是的抗體和BCD幾乎不反應(yīng)，我想咨詢下張老師，有沒有那種抗原抗體反應(yīng)模型可以解釋這種情況。
因為我們并不是從事基礎(chǔ)免疫的工作，所以我們無法對此種情形作出合理解釋。
抗原抗體反應(yīng)定義為一種可逆反應(yīng)，但是不知道是不是和我們遇到的問題有關(guān)系。

我不是免疫學(xué)出身，所以各位大俠，幫幫忙哦

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1樓 2014-05-30 23:11:27

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antibodyknow

銅蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 8 (幼兒園)
金幣: 306.6
紅花: 3
帖子: 24
在線: 11.7小時
蟲號: 3131806
注冊: 2014-04-12
專業(yè): 抗體工程學(xué)

【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

“我們發(fā)現(xiàn)，在同時接觸ABCD，四種抗原的時候，抗體幾乎不和BCD反應(yīng)”
你的這個結(jié)論是如何得到的？（如果可能，將具體實驗設(shè)計貼出了，大家可以幫你分析一下）
我個人認(rèn)為這個結(jié)論不太可靠。因為你的單獨實驗表明此單抗與四種蛋白的結(jié)合能力相當(dāng)。

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回復(fù)此樓

2樓2014-05-31 11:22:34

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