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[求助]
求助:原來可以純化出來的蛋白現(xiàn)在純化不出來了! 已有1人參與
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本人之前構(gòu)建了原核表達(dá)載體--pET30a,轉(zhuǎn)入BL21后誘導(dǎo)原核表達(dá),設(shè)置了0-6小時的誘導(dǎo)時間,可以明顯看到從第二小時開始有目的帶出現(xiàn)。但是,問題出現(xiàn)了,我最近又開始重新誘導(dǎo)這個蛋白,條件和之前都是一樣的,我誘導(dǎo)不出來了! 本來認(rèn)為是菌放的時間長了,活力降低,所以我就重新轉(zhuǎn)化了BL21,但是經(jīng)過誘導(dǎo)之后依然發(fā)現(xiàn)沒有目的帶,F(xiàn)在十分費(fèi)解。有沒有大神也遇到了這樣的情況,請問是怎么解決的?謝謝大家了! |
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