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[求助]
脫鹽純化 已有6人參與
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大俠們好: 我目前要做一個(gè)實(shí)驗(yàn),反應(yīng)步驟是這樣的:第一步反應(yīng)結(jié)束后,用PBS過G-25脫鹽,進(jìn)行純化。但是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室沒有AKTA純化設(shè)備,我要怎么操作呀,有沒有有經(jīng)驗(yàn)的大俠,提供一些參考。 謝謝大家! |

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超濾也可以做到的。 帶濾膜的離心管,在離心的過程中,蛋白分子會被截留下來,小分子雜質(zhì)和液體會被帶走,然后再加入你需要的緩沖液,繼續(xù)離心5-6次,這時(shí)候蛋白所處的緩沖體系就是你后面加入的緩沖液,這樣就更換了Buffer啦,如果你還要換別的Buffer,那就繼續(xù)離心了。 我在工作中,經(jīng)常會需要對蛋白進(jìn)行標(biāo)記,都是用超濾的方法來處理蛋白分子的,目的就是:1、脫鹽純化,去掉蛋白溶液里的各種防腐劑、鹽類;2、更換緩沖液,讓蛋白在合適的pH體系里跟我的標(biāo)記物進(jìn)行反應(yīng)。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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