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差顯二次PCR產(chǎn)物大小與PAGE膠上的不一致
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| 做逆境脅迫差顯時,將差異帶切膠煮沸回收,以回收產(chǎn)物為模板做二次PCR,但是二次PCR產(chǎn)物跑瓊脂糖電泳總是比在PAGE上小很多,比如在PAGE上有500bp,二次PCR時就只有200-300bp,測序后發(fā)現(xiàn)二次PCR產(chǎn)物兩端引物是對的,并且產(chǎn)物的確也是一些和逆境脅迫相關(guān)的基因片段。雖然有結(jié)果了,但是二次PCR結(jié)果和差顯不一致,大家有沒有遇到過這種情況,誰能幫忙解釋下。 |
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