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璃珠直徑≤106 μm 應(yīng)該如何滅菌 已有2人參與
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各位大俠好! 小弟從sigma買一種玻璃珠,直徑≤106 μm , 貨號G8893,F(xiàn)在用肉眼看為粉末狀,我是想用他進(jìn)行乳酸菌細(xì)胞破碎進(jìn)而提取菌體DNA。但現(xiàn)在遇到一個問題,如何給這些粉末狀的小珠子滅菌呢?說明說可以高壓滅菌,但是相對濕度不可超過50%,否則玻璃珠會結(jié)塊!那我應(yīng)該是把玻璃珠融到水里滅菌 還是直接放入小瓶里干滅呢?或者還有其他好方法? 謝各位大俠不吝賜教,感激不盡! |
木蟲 (小有名氣)
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上面順序有點錯了。網(wǎng)上有好幾種方法的,你可以參考下我的,不知道是否適合你的菌和實驗純度要求。要求高建議用試劑盒,雖然試劑盒蠻麻煩的。 1。1ml菌液,STES洗滌菌兩遍。(1遍也可以) 2。吸凈上清,加30ul STES。 3。加玻璃珠,約于菌體等體積。 microprep震蕩3min。 4。加200ul 氯仿/苯酚,200ul ddH2O。 5。充分震蕩混勻3分鐘。高速離心10min,吸取上清至新離心管。(離心后是3層,上清約200ul) 6。加500ul 冰好的乙醇。充分混勻,離心10分鐘,倒掉酒精。 7。加500ul 冰好的70%乙醇。充分混勻,離心10分鐘,倒掉酒精。 8。等酒精完全揮發(fā)后,加入適量ddH2O溶解。 |
木蟲 (小有名氣)

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