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璃珠直徑≤106 μm 應(yīng)該如何滅菌 已有2人參與
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各位大俠好！ 小弟從sigma買一種玻璃珠，直徑≤106 μm ， 貨號G8893�，F(xiàn)在用肉眼看為粉末狀，我是想用他進行乳酸菌細胞破碎進而提取菌體DNA。但現(xiàn)在遇到一個問題，如何給這些粉末狀的小珠子滅菌呢？說明說可以高壓滅菌，但是相對濕度不可超過50%，否則玻璃珠會結(jié)塊！那我應(yīng)該是把玻璃珠融到水里滅菌 還是直接放入小瓶里干滅呢？或者還有其他好方法？ 謝各位大俠不吝賜教，感激不盡！ |
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2014-06-11 14:33:27, 20 K
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上面順序有點錯了。網(wǎng)上有好幾種方法的，你可以參考下我的，不知道是否適合你的菌和實驗純度要求。要求高建議用試劑盒，雖然試劑盒蠻麻煩的。 1。1ml菌液，STES洗滌菌兩遍。（1遍也可以） 2。吸凈上清，加30ul STES。 3。加玻璃珠，約于菌體等體積。 microprep震蕩3min。 4。加200ul 氯仿/苯酚，200ul ddH2O。 5。充分震蕩混勻3分鐘。高速離心10min，吸取上清至新離心管。（離心后是3層，上清約200ul） 6。加500ul 冰好的乙醇。充分混勻，離心10分鐘，倒掉酒精。 7。加500ul 冰好的70%乙醇。充分混勻，離心10分鐘，倒掉酒精。 8。等酒精完全揮發(fā)后，加入適量ddH2O溶解。 |
9樓2014-06-17 15:48:49
2樓2014-06-11 14:50:41
lcat
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3樓2014-06-11 22:28:24
4樓2014-06-12 11:10:01
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