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songdaofeng銀蟲 (著名寫手)
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[求助]
塊狀凝膠材料藥物釋放 已有2人參與
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小弟做了塊狀水凝膠釋放阿霉素，不是那種納米凝膠�，F(xiàn)在打算做free DOX 和Hydrogel loaded DOX 的cytotoxicity實驗，看了很多文獻(xiàn)，都是這種柱狀圖， |
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xibeikongque
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2樓2014-06-13 23:01:44
songdaofeng
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藥物被包裹在圓柱狀的凝膠里面。我打算用間接法做cytotoxicity的實驗，如果是空白凝膠，在PBS浸泡后，直接取浸泡液加在培養(yǎng)液里面，然后做MTT實驗。對于包裹阿霉素的凝膠，我也想用這種方法，但是問題就是，如果用PBS浸泡的話，會有阿霉素釋放出來，那么圖中所給的阿霉素濃度，是否就是浸泡液中阿霉素的濃度呢？如果是的話，干脆就直接取做釋放曲線用的那個釋放液不就行了么？Preparing of drug solution extracted from the CS–Au hybrid hydrogels: both the blank hydrogel and the DOX loaded hydrogel are soaked in fresh PBS for 48h, and then the solution was sterilized. The drug solution extracted is diluted by PBS pH 7.4 in different drug concentration. 這是我看的一個步驟，我提出的問題就是基于這段話。 |
3樓2014-06-14 16:04:27
xibeikongque
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4樓2014-06-14 22:04:58
wanwanaiditu
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songdaofeng: 金幣+5 2014-06-18 18:44:20
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Biodegradable pH/temperature-sensitive oligo(b-amino ester urethane) hydrogels for controlled release of doxorubicin.Acta Biomaterialia 7 (2011) 3123–3130 建議你看看這篇文章，我也做水凝膠載阿霉素的，我想用你說的方法做，我們老板不同意，要求我直接在膠表面養(yǎng)細(xì)胞，我現(xiàn)在還不知道陽性對照怎么做。 |
5樓2014-06-17 17:11:43
songdaofeng
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6樓2014-06-18 18:53:45
wanwanaiditu
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7樓2014-06-18 19:55:27
wanwanaiditu
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songdaofeng(likedong1021代發(fā)): 金幣+10, 感謝回帖交流！ 2014-09-27 23:25:34
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我現(xiàn)在想用這個方法試試從凝膠中釋放出來的阿霉素是否還具有藥效，但是這種方法我我?guī)讉�問題想要跟你探討探討。一是釋放液的滅菌問題，我做到了30天，隔天取樣也至少有15組樣品，再加上空白凝膠組，至少有30組樣品，要是用濾膜滅菌，就要用30個，很浪費，但是我用的是鹽酸阿霉素，不太穩(wěn)定，不知道能否用紫外或者高溫高壓滅菌？二是，假如MTT測毒性，釋放液的加入量問題，因為每次取樣里面還有的阿霉素都不一樣，這樣每次做的實驗就沒有可比性了。 |
8樓2014-06-18 20:13:36
songdaofeng
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你說的很對，阿霉素鹽酸鹽確實不穩(wěn)定，所以釋放液應(yīng)該馬上進(jìn)行紫外測量，這樣的話，釋放曲線是正常的。我覺得只能用濾膜滅菌了，因為高溫鍋滅菌，阿霉素肯定分解了，紫外燈滅菌的效果不是很好，有可能會染菌。還有就是，我覺得不用每個樣品都滅菌的，只需要把你要用的濃度的那個釋放液滅菌就可以了，前提是這些操作盡量連續(xù)的完成，比如說你取了釋放液，就馬上測吸光度，計算濃度，然后去滅菌，再加到培養(yǎng)板里面。我覺得阿霉素濃度差異之所以大，因為幾點原因：1有可能釋放環(huán)境的影響，比如說你選的容器大小，這些都對釋放有一些影響，2就是搖床的轉(zhuǎn)速，我試過，100和200轉(zhuǎn)的震蕩速度，得出的曲線是不同的。3可能是有的樣品，你稍微放久了一會，就變質(zhì)了，所以吸光度就低了很多。釋放液盡量放在冰箱里面，但也不要太久，我總結(jié)的就是，連續(xù)的做每一個過程。 |
9樓2014-06-18 20:38:16
songdaofeng
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10樓2014-06-18 20:41:15
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