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關(guān)于提純小分子多肽pyoverdines除鹽的問(wèn)題 已有4人參與
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大家好，我本科學(xué)的事化學(xué)專業(yè)，初次做多肽純化實(shí)驗(yàn)，遇到一些問(wèn)題想向各位大神求教： 我想提純一種小分子多肽pyoverdines，分子量在1300左右，先用瓊脂糖柱Chelating Sepharose Fast Flow column得到了pyoverdines的粗提液然后凍干加1mL EDTA溶解，然后要用Sephadex G-15 column進(jìn)行除鹽，洗脫液為去離子水，但是，過(guò)完柱子所得的pyoverdines中仍然有EDTA的存在，沒(méi)法得到純的pyoverdines。我的Sephadex G-15 column是自己買填料裝到玻璃柱中去的，柱子的直徑為1cm,柱高15cm,只能手動(dòng)加樣過(guò)柱無(wú)法加壓，我想請(qǐng)教一下各位：EDTA無(wú)法除去是因?yàn)橹幼陨淼脑颍ㄎ衣?tīng)做生物的同學(xué)說(shuō)蛋白純化的時(shí)候一般不需要除去EDTA）還是因?yàn)槲抑犹盍蠜](méi)裝好或者柱子的長(zhǎng)度不夠，達(dá)不到分離除盡鹽的效果。另外，我還試著直接將凍干后的pyoverdines加1mL EDTA溶解后直接用孔徑為500-1000分子量的透析袋用去離子水透析的方法除鹽，但是，2天過(guò)去了，除鹽的效果不好，監(jiān)測(cè)鹽含量依舊很高，想問(wèn)問(wèn)大家有什么能夠除去小分子多肽中的EDTA的方法，謝謝大家  |
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4樓2014-06-20 10:05:34
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2樓2014-06-20 09:49:50
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3樓2014-06-20 10:01:00
wolfman840
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5樓2014-06-20 16:58:22
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