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關(guān)于提純小分子多肽pyoverdines除鹽的問題 已有4人參與
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大家好,我本科學(xué)的事化學(xué)專業(yè),初次做多肽純化實驗,遇到一些問題想向各位大神求教: 我想提純一種小分子多肽pyoverdines,分子量在1300左右,先用瓊脂糖柱Chelating Sepharose Fast Flow column得到了pyoverdines的粗提液然后凍干加1mL EDTA溶解,然后要用Sephadex G-15 column進行除鹽,洗脫液為去離子水,但是,過完柱子所得的pyoverdines中仍然有EDTA的存在,沒法得到純的pyoverdines。我的Sephadex G-15 column是自己買填料裝到玻璃柱中去的,柱子的直徑為1cm,柱高15cm,只能手動加樣過柱無法加壓,我想請教一下各位:EDTA無法除去是因為柱子自身的原因(我聽做生物的同學(xué)說蛋白純化的時候一般不需要除去EDTA)還是因為我柱子填料沒裝好或者柱子的長度不夠,達不到分離除盡鹽的效果。另外,我還試著直接將凍干后的pyoverdines加1mL EDTA溶解后直接用孔徑為500-1000分子量的透析袋用去離子水透析的方法除鹽,但是,2天過去了,除鹽的效果不好,監(jiān)測鹽含量依舊很高,想問問大家有什么能夠除去小分子多肽中的EDTA的方法,謝謝大家 |
木蟲 (正式寫手)
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科學(xué)怪人
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金蟲 (著名寫手)

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