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關(guān)于提純小分子多肽pyoverdines除鹽的問題 已有4人參與
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大家好，我本科學的事化學專業(yè)，初次做多肽純化實驗，遇到一些問題想向各位大神求教： 我想提純一種小分子多肽pyoverdines，分子量在1300左右，先用瓊脂糖柱Chelating Sepharose Fast Flow column得到了pyoverdines的粗提液然后凍干加1mL EDTA溶解，然后要用Sephadex G-15 column進行除鹽，洗脫液為去離子水，但是，過完柱子所得的pyoverdines中仍然有EDTA的存在，沒法得到純的pyoverdines。我的Sephadex G-15 column是自己買填料裝到玻璃柱中去的，柱子的直徑為1cm,柱高15cm,只能手動加樣過柱無法加壓，我想請教一下各位：EDTA無法除去是因為柱子自身的原因（我聽做生物的同學說蛋白純化的時候一般不需要除去EDTA）還是因為我柱子填料沒裝好或者柱子的長度不夠，達不到分離除盡鹽的效果。另外，我還試著直接將凍干后的pyoverdines加1mL EDTA溶解后直接用孔徑為500-1000分子量的透析袋用去離子水透析的方法除鹽，但是，2天過去了，除鹽的效果不好，監(jiān)測鹽含量依舊很高，想問問大家有什么能夠除去小分子多肽中的EDTA的方法，謝謝大家  |
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4樓2014-06-20 10:05:34
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