 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1625 | 回復(fù): 29 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
k1040348263金蟲 (正式寫手)
|
[求助]
想用色譜定量癌細(xì)胞中的DNA，但有好多問題不懂，請(qǐng)各位前輩幫幫忙吧，實(shí)驗(yàn)做不動(dòng)了
|
|||
| 我想破碎癌細(xì)胞，然后定量細(xì)胞中的DNA濃度。現(xiàn)在覺得操作有問題，不知得到的DNA是否有損失。首先，我在3000轉(zhuǎn)速（應(yīng)該不屬于小型離心機(jī)吧，，個(gè)頭還挺大，我也不知離心力多少）下，將細(xì)胞離心了10分鐘，拿出后，離心管的下部有少許白色沉淀，我認(rèn)為是細(xì)胞都離心下來了（不知這時(shí)細(xì)胞破了嗎），然后將培養(yǎng)液吸出，加入了2ml的滅菌水，這時(shí)發(fā)現(xiàn)水中出現(xiàn)了白色的東西，是細(xì)胞膜嗎？然后我又在100w的功率下超聲了5～6分鐘，這時(shí)DNA是不是斷掉了，那蛋白質(zhì)與DNA分開了嗎？我想將DNA酶解成核苷酸，然后進(jìn)色譜定量，不知蛋白質(zhì)或細(xì)胞中的其他東西影響嗎？不知有沒有做過定量細(xì)胞中的DNA的，用的什么方法？ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
» 猜你喜歡
309求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
求化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085600，材料與化工321分求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿南開大學(xué)0710生物學(xué)359求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085600，專業(yè)課化工原理，320分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
290求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
k1040348263
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1966.8
- 散金: 24
- 帖子: 425
- 在線: 119.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2787916
- 注冊(cè): 2013-11-08
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物分析
4樓2014-07-03 21:22:48
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +218 - BioEPI: 11
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1766465
- 注冊(cè): 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
k1040348263: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝你，親。 2014-07-03 21:17:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
k1040348263: 金幣+5, ★★★很有幫助, 非常感謝你，親。 2014-07-03 21:17:56
今天我是來不及回答你怎么多問題，改日給你一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)protocol，我現(xiàn)在剛開完會(huì)，手里沒有，一會(huì)去聚餐。 超聲肯定是能夠粉碎細(xì)胞、DNA甚至斷裂肽鍵。 至于蛋白質(zhì)、DNA和其他細(xì)胞成分彼此分開和特異性鑒定都有成熟的試驗(yàn)方法，你可以參考有關(guān)細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)。徹底裂解細(xì)胞也可以用SDS。蛋白質(zhì)、DNA都可以用特異性波長(zhǎng)的光譜鑒定純度和濃度。 蛋白質(zhì)-DNA形成分子復(fù)合體當(dāng)然會(huì)影響DNA酶解，這就是蛋白質(zhì)-DNA相互作用的研究方法保護(hù)法或者組激發(fā)的基本原理。 “我想將DNA酶解成核苷酸，然后進(jìn)色譜定量”--------我不懂你這一部實(shí)驗(yàn)的目的，如果想定量確定DNA，提純DNA之后，用紫外光很易確定其濃度。 問題太多，我改日解答貼資料。 |
2樓2014-07-03 18:47:50
k1040348263
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1966.8
- 散金: 24
- 帖子: 425
- 在線: 119.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 2787916
- 注冊(cè): 2013-11-08
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物分析
3樓2014-07-03 21:19:34
凌波麗
專家顧問 (知名作家)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +218 - BioEPI: 11
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1766465
- 注冊(cè): 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
★ ★ ★
youlinglyw: 金幣+3, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，生物科學(xué)有你更精彩！ 2014-07-05 02:03:35
youlinglyw: 金幣+3, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，生物科學(xué)有你更精彩！ 2014-07-05 02:03:35
|
從這上面選一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案提取真核細(xì)胞的基因組DNA的實(shí)驗(yàn)方案。 分子克隆指南上下冊(cè)，第三版PDF http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=5864295&fpage=1&target=blank 你這樣設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)沒有任何成功的可能。 |
5樓2014-07-03 23:27:34
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑 +9 | 景隨風(fēng) 2026-03-29 | 14/700 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分 +10 | 辰沐5211314 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +7 | 小蠟新筆 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑 +12 | c297914 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +5 | 小懶蟲不懶了 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +11 | 北道巷 2026-03-24 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求院校招收 +6 | 鶴鯨鴿 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 崔wj 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +7 | 江辭666 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | lin0039 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +5 | hanamiko 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 林之夕 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 085602 289分求調(diào)劑
+8
|
WWW西西弗斯 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料與化工303分求調(diào)劑 +4 | 為學(xué)666 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航材料專317分求調(diào)劑 +5 | 炸呀炸呀炸薯?xiàng)l 2026-03-23 | 5/250 |
|