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shenbaode木蟲 (小有名氣)
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[求助]
HPLC不出峰？或峰型不好，出峰時間有問題？
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| 實(shí)驗(yàn)室有一臺島津HPLC，LC-20AT泵，SPD-M20A檢測器。最近作分析時出了一點(diǎn)一點(diǎn)問題，無法排除。一個同學(xué)用C18柱測定甘草酸，反復(fù)進(jìn)樣，在相同位置會出雜峰，可以確定不是溶劑峰，且樣品是干凈的。（注：本人之前離開實(shí)驗(yàn)室一段時間，其他人做實(shí)驗(yàn)沒有注意，把洗進(jìn)樣針用的甲醇抽干沒有發(fā)現(xiàn)，且連續(xù)做了很多樣品。）本人以為是進(jìn)樣針臟了，反復(fù)進(jìn)甲醇，自動清洗多次，但效果不明顯，仍然有雜峰。后來換成本人測自己的樣品，用與自己前期相同的流動相和柱子測量，居然一個峰都不出。另一個同學(xué)找了一個貌似懂液相的人給看了說液相沒有問題，且他的樣品可以出峰。后來我自己又試了下，發(fā)現(xiàn)有機(jī)相是甲醇的時候出峰，乙腈的時候不出峰。我的樣品流動相是乙腈和冰醋酸水溶液，咨詢了下工程師，讓我用梯度洗脫，出峰了，然后我改變流動相比例，把有機(jī)相（乙腈）比例升高（由22升至48），可以出峰，但出峰位置卻和有機(jī)相為22時出峰僅縮短了1分鐘，且峰型不好。應(yīng)該可以確定有問題，但不清楚問題出在哪里？不知是流動相的原因還是儀器的原因。請高人指點(diǎn)。 |
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