 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4231 | 回復(fù): 6 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) ACI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
tianyahuimou金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
[求助]
島津HPLC出現(xiàn)倒峰是什么原因
|
|||
|
如題，最近用島津HPLC做手性拆分，用的是紫外檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)一個(gè)正峰之后，出現(xiàn)一個(gè)倒峰，然后又出現(xiàn)一個(gè)正峰。開(kāi)始我以為是柱子的問(wèn)題。但是后來(lái)我又換了一根柱子。結(jié)果也是跟第一個(gè)柱子一樣。 兩根柱子是鍵合的大賽璐的IC、ID柱子，對(duì)溶劑的耐受性很好，柱子的壓力也穩(wěn)定。 網(wǎng)上看了下類(lèi)似問(wèn)題，以為是溶劑問(wèn)題。我的流動(dòng)相是石油醚和異丙醇，而樣品是用二氯甲烷溶解的。但是DCM和流動(dòng)相是互溶的，應(yīng)該不存在溶劑對(duì)峰型的影響，因?yàn)橐郧耙策@樣做過(guò)，拆分沒(méi)出現(xiàn)過(guò)問(wèn)題。 是什么原因？急…… 希望各位HPLC高手能指點(diǎn)一二。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專(zhuān)輯推薦
 仿制藥研發(fā) | 新藥研發(fā) |
» 猜你喜歡
招收生物學(xué)/細(xì)胞生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
299求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
調(diào)劑求院校招收
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
調(diào)劑310
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 【教程】島津高效液相色譜LCsolution工作站中文教程（絕對(duì)推薦）
已經(jīng)有367人回復(fù)
- 關(guān)于HPLC出現(xiàn)倒峰的問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 島津HPLC測(cè)環(huán)孢素溶液，理論塔板數(shù)400
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 我做HPLC出的峰峰寬比較大 峰形難看 這是什么原因？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 液相色譜出現(xiàn)倒峰的原因
已經(jīng)有22人回復(fù)
- HPLC樣品檢測(cè)有倒峰是怎么回事？？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助】HPLC有鬼峰出現(xiàn)，急尋解決方案
已經(jīng)有62人回復(fù)
- 【交流】HPLC交流交流，呵呵，有問(wèn)題集中討論嘛
已經(jīng)有104人回復(fù)
- 【求助】HPLC檢測(cè)出現(xiàn)倒峰原因是什么？怎么解決？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助】島津高效液相色譜儀中怎么設(shè)置梯度淋洗？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】HPLC出倒峰的問(wèn)題�。�！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助】hplc 出峰時(shí)有部分組分峰出現(xiàn)在基線以下？
已經(jīng)有5人回復(fù)
guomingjuan
新蟲(chóng) (小有名氣)
- ACI: 1
- 應(yīng)助: 25 (小學(xué)生)
- 金幣: 298.1
- 帖子: 66
- 在線: 56.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1849140
- 注冊(cè): 2012-06-06
- 專(zhuān)業(yè): 藥物分析
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
soundhorizo: 金幣+2, ACI+1, 感謝應(yīng)助 歡迎常來(lái)分析版交流指導(dǎo)^^ 2012-07-21 21:50:45
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
soundhorizo: 金幣+2, ACI+1, 感謝應(yīng)助 歡迎常來(lái)分析版交流指導(dǎo)^^ 2012-07-21 21:50:45
|
出現(xiàn)倒峰的原因： 1.常為溶劑峰,流動(dòng)相的紫外吸收大于樣品的溶劑的紫外吸收,就產(chǎn)生倒峰. 2.樣品中的雜質(zhì)沒(méi)有紫處吸收或吸收很小,而流動(dòng)相紫外吸收大,如用甲醇時(shí)波長(zhǎng)設(shè)定在220nm以下時(shí),常出現(xiàn)這種現(xiàn)象. 3.進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入了空氣也會(huì)導(dǎo)致的. 4.如果流動(dòng)相有紫外吸收的雜質(zhì)，使用紫外檢測(cè)器時(shí)，會(huì)產(chǎn)生倒峰，必須用高純度的溶劑作為流動(dòng)相。 5.檢測(cè)器的極性接反了，也會(huì)出現(xiàn)倒峰。 第一，用的是什么檢測(cè)器？如果是示差折光，那很正常； 第二，倒峰在什么位置？如果是溶劑峰，也很正常，要去除的話，溶劑改用流動(dòng)相； 第三，如果是紫外檢測(cè)器（MWD,OR DAD）,有沒(méi)有加參比波長(zhǎng)？如果有，去掉參比波長(zhǎng)或另選合適的參比波長(zhǎng)； 第四，如果是紫外檢測(cè)器，流量池里是否有氣泡產(chǎn)生？1.抽濾或超聲去除流動(dòng)相里的氣泡；2.檢查在線脫氣機(jī)（如果有的話）；3.調(diào)節(jié)背壓； 第五，流動(dòng)相是否在該波長(zhǎng)（用紫外檢測(cè)器的話）有較大的背景？1.檢查你用的溶劑的等級(jí)；2.檢查色譜條件的合理性。 我認(rèn)為是參比波長(zhǎng)設(shè)置的問(wèn)題，試著換個(gè)參比波長(zhǎng)看看 多半是因?yàn)闃悠返模校戎蹬c流動(dòng)相的ＰＨ值不一致造成的，解決辦法：加大鹽的濃度，用流動(dòng)相溶解樣品即可． 流動(dòng)相背景吸收波長(zhǎng)低于檢測(cè)波長(zhǎng) 1. 組分的吸收小于流動(dòng)相的背景吸收，可能原因是流動(dòng)相中加入截止波長(zhǎng)較大的成分或波長(zhǎng)選擇不合適 2.二極管陣列檢測(cè)器中參比波長(zhǎng)處吸收大于組分吸收； １、 首先確定是還是柱還是檢測(cè)器的問(wèn)題：換下柱看是否仍存在倒峰，如果不行再換檢測(cè)器，以確定是否檢測(cè)器或者柱的問(wèn)題�；蛘呤裁炊疾灰獡Q單純換個(gè)其他化學(xué)成分，看是否是因?yàn)槟愕臉悠反嬖趩?wèn)題。 2、如果都做了，還是不行，就考慮是否流動(dòng)相問(wèn)題，一般DAD存在有規(guī)律倒峰的現(xiàn)象還真的不是很好解釋?zhuān)茨馑己孟笫堑狗逯皇歉愕闹鞒煞肿�，這樣你可以首先進(jìn)個(gè)空白溶劑樣品，看是否還有倒峰存在，如果空白樣品沒(méi)有倒峰那么就是你樣品問(wèn)題，是否你樣品處理的有問(wèn)題， 一般液相對(duì)流動(dòng)相的PH控制在大概2.5-7.5范圍，如果過(guò)酸或過(guò)堿會(huì)導(dǎo)致填料被破壞引起成分在柱上的洗拖保留發(fā)生變化而導(dǎo)致規(guī)律倒峰出現(xiàn)也有可能，測(cè)下您的流動(dòng)相PH以保證這個(gè)沒(méi)問(wèn)題。樣品中殘留的一點(diǎn)酸或堿應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題，因?yàn)樗釅A在柱上基本沒(méi)有保留，且量小應(yīng)該沒(méi)影響 倒峰的出現(xiàn)，我個(gè)人認(rèn)為是色譜柱的殘余硅羥基所致，同一個(gè)色譜條件，我曾經(jīng)分別用非端基封尾柱和端基封尾柱考察，前者即便是進(jìn)流動(dòng)相也會(huì)出現(xiàn)負(fù)峰，后者則沒(méi)有，推斷應(yīng)為殘余硅羥基對(duì)進(jìn)樣樣品中的部分離子造成吸附，使進(jìn)樣部分的液體與流動(dòng)相產(chǎn)生差異，由于溶質(zhì)離子經(jīng)過(guò)檢測(cè)器時(shí)，紫外吸收信號(hào)減小，所以形成負(fù)方向的色譜峰。 1.樣品引入 2.樣品與流動(dòng)相反應(yīng)所致 3.檢測(cè)條件不合適,建議換二極管陣列查找 4.外部引入的污染 最后一點(diǎn)幾率很小,但也會(huì)存在的,就是儀器設(shè)備的系統(tǒng)誤差 |
6樓2012-06-18 16:27:19
zxwcn
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- ACI: 1
- 應(yīng)助: 274 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.196
- 金幣: 8951.1
- 散金: 169
- 紅花: 13
- 帖子: 1263
- 在線: 390.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 847146
- 注冊(cè): 2009-09-13
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 有機(jī)分析
2樓2012-06-17 21:17:32
houqian387
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 204 (大學(xué)生)
- 金幣: 409.2
- 紅花: 6
- 帖子: 299
- 在線: 27.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1162569
- 注冊(cè): 2010-12-04
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 色譜分析
3樓2012-06-18 07:43:13
癡夷子皮
版主 (文壇精英)
老痞
- ACI: 12
- 應(yīng)助: 2016 (講師)
- 貴賓: 5.368
- 金幣: 54487.3
- 散金: 41688
- 紅花: 303
- 沙發(fā): 1206
- 帖子: 32611
- 在線: 4303.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 674536
- 注冊(cè): 2008-12-14
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 無(wú)神論
- 管轄: 人文社科
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
soundhorizo: 金幣+2 2012-07-21 21:51:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
soundhorizo: 金幣+2 2012-07-21 21:51:12
|
同意3樓。 倒峰產(chǎn)生，很多時(shí)候是流動(dòng)相或溶劑中某些雜質(zhì)紫外吸收低于分析波長(zhǎng)所致，和柱子關(guān)系不大。關(guān)鍵還是得流動(dòng)相及溶劑處找原因。當(dāng)然，不排除檢測(cè)器性能原因。 首先，使用了石油醚，倒不如使用色譜純的正己烷；其次，溶劑和流動(dòng)相互溶與溶劑效應(yīng)的產(chǎn)生無(wú)直接關(guān)系，不能主觀臆斷說(shuō)“應(yīng)該不存在影響”，即使使用流動(dòng)相作溶劑，也不能完全保證不發(fā)生溶劑效應(yīng)。 |
4樓2012-06-18 10:34:47
32862500
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 102 (高中生)
- 金幣: 2126.3
- 散金: 4
- 紅花: 1
- 帖子: 286
- 在線: 38.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 633826
- 注冊(cè): 2008-10-22
- 專(zhuān)業(yè): 有機(jī)分析
5樓2012-06-18 14:21:26
yugijiang
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 661 (博士)
- 貴賓: 0.005
- 金幣: 4018.4
- 紅花: 11
- 帖子: 1790
- 在線: 178小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 416091
- 注冊(cè): 2007-06-29
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 藥物分析
7樓2012-07-21 21:49:19
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 tianyahuimou 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[碩博家園] 求調(diào)劑 有機(jī)化學(xué)考研356分 +3 | Nadiums 2026-03-25 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +5 | 愛(ài)羈絆 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856材料化工調(diào)劑 總分330 +11 | zhubinhao 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化085600材料專(zhuān)碩275|有文章專(zhuān)利｜求調(diào)劑 +7 | Micky11223 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專(zhuān)業(yè)總分300求調(diào)劑 +8 | 曼111 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 希望上岸阿小楊 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲(chóng)085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿南師大0703化學(xué) 275求調(diào)劑 +4 | Ripcord上岸 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +10 | 幸運(yùn)的醬醬 2026-03-22 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 李嘉圖·S·路 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 北京林業(yè)大學(xué)碩導(dǎo)招生廣告 +6 | kongweilin 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +3 | Aoyijiang 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【雙一流院校新能源、環(huán)境材料，材料加工與模擬招收大量調(diào)劑】 +4 | Higraduate 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程 317求調(diào)劑 +4 | JKSOIID 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專(zhuān)碩 335 分求調(diào)劑 +4 | 拒絕冷暴力 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +3 | wcq131415 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|