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花葬夏祭新蟲 (初入文壇)
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[求助]
氨基化的玻璃與ssDNA作用后,與另一條互補(bǔ)ssDNA作用下不來 已有1人參與
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本人學(xué)化學(xué)的,所以對(duì)生物的東西不是很了解 實(shí)驗(yàn)情況如下: 1.將玻璃氨基化 2.氨基化的玻璃與ssDNA在Tris-Buffer中(20 mM Tris+37.5 mM MgCL2,用HC調(diào)節(jié)到7.5)于37℃下反應(yīng)30min,表征證明該ssDNA上去了 3.與另一條互補(bǔ)的ssDNA鏈作用,希望能夠把前一條ssDNA拉下來 第一條cap ssDNA: 5'-AAT GCT AGC TAA TCA ATC GGG3' 第二條Target ssDNA:5'-CCC GAT TGA TTA GCA AGC ATT-3‘ 問題: 第三步,通過互補(bǔ)作用并不能讓ssDNA雜交,難道在非均相的DNA雜交對(duì)于溫度的要求很高嗎?(查閱文獻(xiàn)知道最適的雜交溫度=Tm-15) 求大神指導(dǎo)~~太痛苦了~ |
新蟲 (初入文壇)
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鐵桿木蟲 (著名寫手)
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