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花葬夏祭新蟲 (初入文壇)
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[求助]
氨基化的玻璃與ssDNA作用后，與另一條互補(bǔ)ssDNA作用下不來 已有1人參與
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本人學(xué)化學(xué)的，所以對生物的東西不是很了解 實(shí)驗(yàn)情況如下： 1.將玻璃氨基化 2.氨基化的玻璃與ssDNA在Tris-Buffer中（20 mM Tris+37.5 mM MgCL2，用HC調(diào)節(jié)到7.5）于37℃下反應(yīng)30min，表征證明該ssDNA上去了 3.與另一條互補(bǔ)的ssDNA鏈作用，希望能夠把前一條ssDNA拉下來 第一條cap ssDNA: 5'-AAT GCT AGC TAA TCA ATC GGG3' 第二條Target ssDNA：5'-CCC GAT TGA TTA GCA AGC ATT-3‘ 問題： 第三步，通過互補(bǔ)作用并不能讓ssDNA雜交，難道在非均相的DNA雜交對于溫度的要求很高嗎？（查閱文獻(xiàn)知道最適的雜交溫度=Tm-15） 求大神指導(dǎo)~~太痛苦了~ |
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yuntcren
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5樓2014-07-17 09:52:20
yuntcren
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6樓2014-07-22 12:09:59
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