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hellovivid金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
如何熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞
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在研究巨噬細(xì)胞對(duì)納米顆粒的吞噬作用,想照一張有熒光效應(yīng)的圖,因?yàn)槠渌谋碚骼镆呀?jīng)用了TEM。 我的納米顆粒發(fā)紅光,現(xiàn)在初步計(jì)劃用rabbit anti-rat F4/80標(biāo)記巨噬細(xì)胞,再用FITC標(biāo)記的donkey anti-rabbit IgG現(xiàn)熒光 想問(wèn)大家一下這種方法可以嗎?如果不行,應(yīng)該如何標(biāo)記呢? 還有如果用納米金,熒光在多少波長(zhǎng)下激發(fā)呢? 十分感謝! |
納米生物學(xué) |
鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)
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一個(gè)一個(gè)回答 第一個(gè)問(wèn)題,用F4/80標(biāo)記巨噬細(xì)胞是可以的,流式就是用它來(lái)圈門(mén)的,如能確定納米顆粒刺激后巨噬細(xì)胞分化方向,也可以采用對(duì)應(yīng)的marker標(biāo)記, e.g. CD16/32 (M1)CD168、CD206(M2) 第二個(gè)問(wèn)題,納米金的話, 我猜你指的是團(tuán)簇,我自己合成的Au12團(tuán)簇是用紫外光激發(fā)的,具體的,我采用DAPI的參數(shù)就能看到我的顆粒,如果你合成的是近紅外發(fā)射的量子點(diǎn),就要考慮一下你的confocal是否有對(duì)應(yīng)的紅色激光器了,如果你說(shuō)的不是團(tuán)簇,而是金棒,則需要用雙光子激發(fā),波長(zhǎng)在808nm附近 祝你獲得理想結(jié)果 |
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