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hellovivid

金蟲 (初入文壇)

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專業(yè): 生化，納米材料

[求助] 如何熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞

在研究巨噬細(xì)胞對(duì)納米顆粒的吞噬作用，想照一張有熒光效應(yīng)的圖，因?yàn)槠渌谋碚骼镆呀?jīng)用了TEM。
我的納米顆粒發(fā)紅光，現(xiàn)在初步計(jì)劃用rabbit anti-rat F4/80標(biāo)記巨噬細(xì)胞，再用FITC標(biāo)記的donkey anti-rabbit IgG現(xiàn)熒光
想問大家一下這種方法可以嗎？如果不行，應(yīng)該如何標(biāo)記呢？
還有如果用納米金，熒光在多少波長(zhǎng)下激發(fā)呢？

十分感謝！

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納米生物學(xué)

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1樓 2014-07-08 02:09:00

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鐵桿木蟲 (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

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hellovivid(likedong1021代發(fā)): 金幣+5, 感謝回帖交流！ 2014-10-11 18:05:55

一個(gè)一個(gè)回答
第一個(gè)問題，用F4/80標(biāo)記巨噬細(xì)胞是可以的，流式就是用它來圈門的，如能確定納米顆粒刺激后巨噬細(xì)胞分化方向，也可以采用對(duì)應(yīng)的marker標(biāo)記， e.g. CD16/32 （M1）CD168、CD206（M2)
第二個(gè)問題，納米金的話，我猜你指的是團(tuán)簇，我自己合成的Au12團(tuán)簇是用紫外光激發(fā)的，具體的，我采用DAPI的參數(shù)就能看到我的顆粒，如果你合成的是近紅外發(fā)射的量子點(diǎn)，就要考慮一下你的confocal是否有對(duì)應(yīng)的紅色激光器了，如果你說的不是團(tuán)簇，而是金棒，則需要用雙光子激發(fā)，波長(zhǎng)在808nm附近
祝你獲得理想結(jié)果

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