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CHIP超聲遇到了怪現(xiàn)象 已有3人參與
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最近做CHIP實(shí)驗(yàn)，結(jié)果卡在了超聲這一步， 細(xì)胞類型是癌細(xì)胞，試劑盒用的是milipore的，細(xì)胞福爾馬林固定十分鐘，裂解，開(kāi)始超聲： 超聲條件：30%最大功率，工作功率在10w左右，超聲15秒，停45秒，反復(fù)…… 我試過(guò)超聲10次，20次，40次， 然后取5ul 超聲產(chǎn)物（或未超聲的細(xì)胞裂解液）+45ul CHIP dilute buffer，加RNA酶A，37度半小時(shí)，加蛋白酶K，62度2小時(shí)， 然后取20ul，電泳 結(jié)果如圖所示 不管我超聲10次 20次 還是40次，結(jié)果都是如此 請(qǐng)高手指導(dǎo)，我該怎么辦？ Sonication_20140708.jpg |
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| 我用的也是millipore，你用的哪個(gè)型號(hào)，我超聲是VCX的，也可能是你功率不夠大，你可以這樣試試功率，拿一個(gè)樣本出來(lái)，超30%，35%，40%，45%，50%，每超完5-10s觀察有無(wú)泡沫產(chǎn)生，沒(méi)有可以繼續(xù)增加功率，直到產(chǎn)生泡沫前那個(gè)功率，然后定了功率后就是摸超聲循環(huán)，5次，10次，15次逐次遞增，每次超完后取2-5ul出來(lái)待跑電泳，我跑電泳沒(méi)有加那個(gè)chip dulition |
3樓2014-07-17 16:39:10
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8樓2014-07-22 11:50:32
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2樓2014-07-17 16:24:34
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5樓2014-07-18 01:59:43
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6樓2014-07-18 09:00:23
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9樓2014-07-23 12:02:49
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