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urbest金蟲 (正式寫手)
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[求助]
CHIP超聲遇到了怪現(xiàn)象 已有3人參與
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最近做CHIP實驗，結(jié)果卡在了超聲這一步， 細胞類型是癌細胞，試劑盒用的是milipore的，細胞福爾馬林固定十分鐘，裂解，開始超聲： 超聲條件：30%最大功率，工作功率在10w左右，超聲15秒，停45秒，反復…… 我試過超聲10次，20次，40次， 然后取5ul 超聲產(chǎn)物（或未超聲的細胞裂解液）+45ul CHIP dilute buffer，加RNA酶A，37度半小時，加蛋白酶K，62度2小時， 然后取20ul，電泳 結(jié)果如圖所示 不管我超聲10次 20次 還是40次，結(jié)果都是如此 請高手指導，我該怎么辦？ Sonication_20140708.jpg |
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| 我用的也是millipore，你用的哪個型號，我超聲是VCX的，也可能是你功率不夠大，你可以這樣試試功率，拿一個樣本出來，超30%，35%，40%，45%，50%，每超完5-10s觀察有無泡沫產(chǎn)生，沒有可以繼續(xù)增加功率，直到產(chǎn)生泡沫前那個功率，然后定了功率后就是摸超聲循環(huán)，5次，10次，15次逐次遞增，每次超完后取2-5ul出來待跑電泳，我跑電泳沒有加那個chip dulition |
3樓2014-07-17 16:39:10
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2樓2014-07-17 16:24:34
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4樓2014-07-18 01:58:30
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5樓2014-07-18 01:59:43
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