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dizi011新蟲 (初入文壇)
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[求助]
(求助)關(guān)于HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的問題~ 已有2人參與
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我養(yǎng)的肝癌細(xì)胞HepG2生長(zhǎng)速度超慢,一般正常傳代之后4-5天才能長(zhǎng)滿,癌細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的這么慢嗎~我用的培養(yǎng)基是1640+10%血清+1%雙抗,是什么原因造成的吶~求大神們指導(dǎo)哈~ 下面這個(gè)是1傳2之后生長(zhǎng)5天的結(jié)果~ IMG_0569.JPG |

木蟲 (職業(yè)作家)
| 細(xì)胞長(zhǎng)的慢的原因:1、接種密度太低,只會(huì)長(zhǎng)成一小塊一小塊的細(xì)胞,中間的細(xì)胞會(huì)沒有空間就不會(huì)分裂生長(zhǎng);2、吹打不夠,消化下來的細(xì)胞沒有吹打成單個(gè),接種之后也只是會(huì)成小塊生長(zhǎng),中間的細(xì)胞沒有空間不分裂;3、血清品質(zhì)不夠,很多細(xì)胞只靠血清和培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng),只有一小部分細(xì)胞有旁分泌的功能,對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求沒有那么高; |
專家顧問 (職業(yè)作家)
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專家經(jīng)驗(yàn): +383 |
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1、消化時(shí)間要合適,時(shí)間太短消化不完全,細(xì)胞之間相互粘連在一起;時(shí)間太長(zhǎng)影響細(xì)胞活力。 2、接種密度,一瓶(長(zhǎng)滿80%)傳代3-5瓶合適 3、不清楚雙抗對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有沒有影響,但沒有這么高濃度雙抗過,操作規(guī)范的話不加雙抗也行 4、血清質(zhì)量問題?換其他血清試試。按說HepG2用小牛血清就長(zhǎng)的很好,可以換新生牛甚至胎牛試試。 5、培養(yǎng)基質(zhì)量問題,類似血清,要用個(gè)信得過的牌子。我之前是用DMEM高糖養(yǎng)的HepG2。 |
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