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dongjiqiao鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
陰離子DEAE純化酶,洗脫峰毛刺兒,洗脫后還有毛刺兒,希望得到中間條帶的樣品 已有2人參與
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蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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| 我覺(jué)得很奇怪,你都還沒(méi)有開(kāi)始洗脫,就有兩個(gè)大峰出來(lái)了,洗脫的過(guò)程中反而沒(méi)有什么峰。而且你的程序?yàn)槭裁丛O(shè)定用洗脫緩沖液洗脫的時(shí)間占了程序時(shí)間的一半?當(dāng)然,層析所用的任何液體都是要用0.45微米的濾膜抽濾除去固體顆粒的,以免堵塞填料和其它。紫外燈的問(wèn)題反而不要緊,因?yàn)榫同F(xiàn)在的圖看來(lái)還是可以滿足需求的。 |

鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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關(guān)于洗脫前的出峰問(wèn)題,應(yīng)該是因?yàn)槲疫M(jìn)樣進(jìn)了兩次,這是兩個(gè)穿透峰,樣品濃度較高,沒(méi)有吸附到柱子上,都直接穿透出來(lái)了;關(guān)于洗脫時(shí)間,第一次做,不知道什么時(shí)候全部洗脫下來(lái),這不是看后面還有懸崖峭壁峰么,怕是還有樣品能下托下來(lái),所以時(shí)間略長(zhǎng)。洗脫開(kāi)始的時(shí)間,是不是應(yīng)該等穿透峰開(kāi)始降了,立馬就梯度洗脫呢?我是不是應(yīng)該多設(shè)幾個(gè)梯度進(jìn)行洗脫,比如,0-0.2M 10個(gè)柱體積,0.2-0.6M 10個(gè)柱體積這樣子? |

專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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