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質(zhì)粒提取問題，都快1個月了，求解決了�。� 已有4人參與
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將別人給的質(zhì)粒 （不知道抗性、序列，只知道里面有我需要的目的基因片段�？剐缘拇_定我是分別把轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞分別涂到含有A、C、K的平板上，結(jié)果A和K的板子長了，然后轉(zhuǎn)點到A+K的平板上，也長了，提取質(zhì)粒。）導入DH5@中進行擴展，然后用質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒（試劑盒沒有問題，實驗室別人都能正常提取出來），濃度大概在100ng/ul左右。 下一步就是驗證，將別人給的質(zhì)粒和自己提取的質(zhì)粒進行電泳驗證，結(jié)果如下： 分析：明顯我提取出來的質(zhì)粒和別人給的質(zhì)粒結(jié)果差別很大 我的問題：是否這個質(zhì)粒不適宜DH5@菌株里面擴增，還有最上面的條帶是什么？基因組？RNA？為什么我把純質(zhì)粒導進去，提出來成這樣了，按理說質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率還是很高的啊。 為了進一步驗證我接下來有了單酶切3h兩個質(zhì)粒，跑膠，結(jié)果如下： marker后Lane1:別人的質(zhì)粒單酶切結(jié)果 Lane2：自己的質(zhì)粒酶切 綜上：我的困惑時怎么樣擴增別人的質(zhì)粒，樣品越來越少了，都快1個月，各種糾結(jié)啊，有沒有大神也遇到這樣的問題，求解決啊，金幣多多的？ 質(zhì)粒跑膠圖 酶切結(jié)果圖 |
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2樓2014-07-30 15:47:00
3樓2014-07-30 16:09:05
xy656691
金蟲 (正式寫手)
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4樓2014-07-30 16:23:17
5樓2014-07-30 19:44:58
aofeng860308
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6樓2014-07-30 20:20:15
zkz38210098
鐵桿木蟲 (小有名氣)
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7樓2014-07-31 12:26:26
鬼羽帝魂
木蟲 (著名寫手)
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8樓2014-07-31 15:45:31
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