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園園補補鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
轉錄組測序后,與NCBI上提供的參考基因組mapping率極低的問題 已有6人參與
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剛剛接觸生物信息學就遇到了一個問題,請各位幫忙解答,不勝感激。 在確定用的菌種無誤的情況下,將新鮮菌體液氮處理后干冰送樣至公司,之后所有的工作都是公司專業(yè)人員操作,但是最近幾天卻被告知測出來的基因組與NCBI上提供的參考基因組mapping率極低,根本無法理解,找不到原因也沒辦法讓公司重測,就這樣一直耗著,請高手幫忙解答一下 |
木蟲 (職業(yè)作家)

金蟲 (小有名氣)
鐵蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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需要查看原始數(shù)據后才能做出判斷?赡茉颍 1、測序質量過低。高通量測序大約會有一定比例測序的lane整個失敗,但比例很低。如果遇到不懂的人當然就直接把低質量的一起比對再說啦。 2、樣本污染。這個就像樓上說的,blast一下。如果樓主不會生物信息,就挑選個20多條看看,注意隨機挑選,不要光看前面的,前面的read一般質量都稍差一點哦。但是發(fā)現(xiàn)是樣本污染,責任就不好界定啦。以我們實驗室的經驗,很多可能還真是自己不小心。因為有時候污染的樣本我通過信息分析后確定了是其它樣本污染,所謂的其它樣本都沒送給公司。 3、大規(guī)模變異?不知道你的菌種,NCBI上的reference一般不會和你的一模一樣,萬一100個bp中有5個變異,你就比對不上啦。測序質量稍微低點,100個bp中有2-3個變異也比不上啊。 綜上覺得,一個實驗室還是需要真正懂信息分析的人。見過很多實驗室生物信息的人,發(fā)現(xiàn)完全令人覺得生物信息人員原來可以這么水。 |

鐵蟲 (小有名氣)
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