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[求助]
瓊脂擴(kuò)散法相關(guān)問(wèn)題 已有2人參與
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各位哥哥姐姐，我用 測(cè)抑菌活性，但是重復(fù)性差，不知道是什么原因。自己揣測(cè)除了跟我的發(fā)酵上清活性的穩(wěn)定性有關(guān)外，可能跟瓊脂濃度，指示菌濃度和上清液擴(kuò)散有關(guān)，有以下三個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教一下大蟲們：1、請(qǐng)問(wèn)瓊脂濃度跟抑菌效果是不是有關(guān)系？什么濃度最好呢？ 2、指示菌是不是要控制一定OD值的濃度？ 3、加入發(fā)酵上清液后我是放超凈臺(tái)吹干再放培養(yǎng)箱培養(yǎng)，你們是不是有吹干這步，或者直接正放著培養(yǎng)呢？ 跪求啊，替我?guī)熋冒l(fā)帖求救  |
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若溪
金蟲 (正式寫手)
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3樓2014-08-16 13:40:38
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:12
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:12
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1、請(qǐng)問(wèn)瓊脂濃度跟抑菌效果是不是有關(guān)系？什么濃度最好呢？ ——當(dāng)然有關(guān)系，瓊脂濃度15%-20%就好，最好重復(fù)試驗(yàn)都用同一批次的培養(yǎng)基較好！ 2、指示菌是不是要控制一定OD值的濃度？ ——指示菌沒(méi)有必要控制OD值，但在加入培養(yǎng)基之前要控制適當(dāng)?shù)臐舛龋挂志Ρ容^好看！ 3、加入發(fā)酵上清液后我是放超凈臺(tái)吹干再放培養(yǎng)箱培養(yǎng)，你們是不是有吹干這步，或者直接正放著培養(yǎng)呢？ ——這里面描述的不詳細(xì)，如果不同批次培養(yǎng)的發(fā)酵液可能也會(huì)有很大的區(qū)別。 |
2樓2014-08-16 09:50:59
wuyaping
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4樓2014-08-16 18:59:34
【答案】應(yīng)助回帖
★
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:43
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:43
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好吧，其實(shí)吹不吹干芽孢菌都會(huì)生長(zhǎng)的，除非你用微孔濾膜過(guò)濾來(lái)排除活菌的干擾。如果要是細(xì)究的話，這里面就會(huì)有很多的問(wèn)題： 1）平板培養(yǎng)基倒的厚薄會(huì)影響抑菌圈的大�。� 2）剛倒的新鮮平板和倒過(guò)之后放置一段時(shí)間的平板抑菌圈大小差別較大； 3）不同的培養(yǎng)基可能會(huì)影響抑菌圈的大�。� 4）指示菌的濃度可能會(huì)影響抑菌圈的大��； 5）培養(yǎng)液培養(yǎng)的時(shí)間長(zhǎng)短會(huì)影響抑菌圈的大�。� ........... 如果是芽孢桿菌，其可能的抑菌物質(zhì)是抗菌肽類，可以設(shè)置一些對(duì)照試驗(yàn)，如熱失活，蛋白酶處理等；不過(guò)這樣的試驗(yàn)早就有人做了，不好玩！ |
5樓2014-08-16 21:02:23
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