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[求助]
瓊脂擴散法相關問題 已有2人參與
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各位哥哥姐姐，我用 測抑菌活性，但是重復性差，不知道是什么原因。自己揣測除了跟我的發(fā)酵上清活性的穩(wěn)定性有關外，可能跟瓊脂濃度，指示菌濃度和上清液擴散有關，有以下三個問題想請教一下大蟲們：1、請問瓊脂濃度跟抑菌效果是不是有關系？什么濃度最好呢？ 2、指示菌是不是要控制一定OD值的濃度？ 3、加入發(fā)酵上清液后我是放超凈臺吹干再放培養(yǎng)箱培養(yǎng)，你們是不是有吹干這步，或者直接正放著培養(yǎng)呢？ 跪求啊，替我?guī)熋冒l(fā)帖求救  |
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wuyaping
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4樓2014-08-16 18:59:34
【答案】應助回帖
★
感謝參與，應助指數 +1
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:12
感謝參與，應助指數 +1
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:12
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1、請問瓊脂濃度跟抑菌效果是不是有關系？什么濃度最好呢？ ——當然有關系，瓊脂濃度15%-20%就好，最好重復試驗都用同一批次的培養(yǎng)基較好！ 2、指示菌是不是要控制一定OD值的濃度？ ——指示菌沒有必要控制OD值，但在加入培養(yǎng)基之前要控制適當的濃度，使抑菌圈比較好看！ 3、加入發(fā)酵上清液后我是放超凈臺吹干再放培養(yǎng)箱培養(yǎng)，你們是不是有吹干這步，或者直接正放著培養(yǎng)呢？ ——這里面描述的不詳細，如果不同批次培養(yǎng)的發(fā)酵液可能也會有很大的區(qū)別。 |
2樓2014-08-16 09:50:59
若溪
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3樓2014-08-16 13:40:38
【答案】應助回帖
★
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:43
夏至1990: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝 2014-08-18 14:38:43
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好吧，其實吹不吹干芽孢菌都會生長的，除非你用微孔濾膜過濾來排除活菌的干擾。如果要是細究的話，這里面就會有很多的問題： 1）平板培養(yǎng)基倒的厚薄會影響抑菌圈的大小； 2）剛倒的新鮮平板和倒過之后放置一段時間的平板抑菌圈大小差別較大； 3）不同的培養(yǎng)基可能會影響抑菌圈的大��； 4）指示菌的濃度可能會影響抑菌圈的大��； 5）培養(yǎng)液培養(yǎng)的時間長短會影響抑菌圈的大��； ........... 如果是芽孢桿菌，其可能的抑菌物質是抗菌肽類，可以設置一些對照試驗，如熱失活，蛋白酶處理等；不過這樣的試驗早就有人做了，不好玩！ |
5樓2014-08-16 21:02:23
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