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prominetsun金蟲 (正式寫手)
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[求助]
懇求各位大神支招，我快崩潰了！��！ 已有7人參與
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各位蟲友們，我是即將研二的新手，剛開始跟師兄做實驗的時候，一切很順利，PCR條帶也很清晰，但是！過了一個月放假回來就不行了！怎么P都P不出來��！marker有條帶，其余什么都沒有了，樣品就跟沒添加過一樣，放在紫外成像儀中什么都沒有�。。�！為此我還做過對比試驗，就是加新酶再做一遍，加新的dNTP再做一遍，但是都于事無補！！除了marker有條帶什么都沒有�。�！現(xiàn)在實驗處于停滯狀態(tài)了，根本進行不下去。。�？炜蘖说嵌疾恢朗裁丛�。。。照了其他實驗室的PCR儀也沒做出來。。。請問各位蟲友有沒有遇到過類似情況？非常希望大家能指點迷津！不然我就該急死了。。。 關于PCR: 我做的是 Pfu 酶的，片段長度在1.5 kb 左右，延伸時間一分半鐘，流程為95°C解鏈，55℃退火，75℃延伸，無論配50u還是25u體系都沒法P出來。。注意：我以前是可以P出來的。。�？蕖�。 各位大神，我最近兩個月都浪費在上面了，無任何頭緒，求各位的意見！要不就該被逼瘋了。。。。。嗚。。。。。嗚。。。。 |
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 核酸生物學實驗經(jīng)驗 |
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11樓2014-08-17 20:12:24
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