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prominetsun金蟲 (正式寫手)
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[求助]
懇求各位大神支招，我快崩潰了�。�！ 已有7人參與
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各位蟲友們，我是即將研二的新手，剛開始跟師兄做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，一切很順利，PCR條帶也很清晰，但是！過了一個(gè)月放假回來就不行了！怎么P都P不出來��！marker有條帶，其余什么都沒有了，樣品就跟沒添加過一樣，放在紫外成像儀中什么都沒有啊�。�！為此我還做過對(duì)比試驗(yàn)，就是加新酶再做一遍，加新的dNTP再做一遍，但是都于事無補(bǔ)��！除了marker有條帶什么都沒有！��！現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)處于停滯狀態(tài)了，根本進(jìn)行不下去。。�？炜蘖说嵌疾恢朗裁丛�。。。照了其他實(shí)驗(yàn)室的PCR儀也沒做出來。。。請(qǐng)問各位蟲友有沒有遇到過類似情況？非常希望大家能指點(diǎn)迷津！不然我就該急死了。。。 關(guān)于PCR: 我做的是 Pfu 酶的，片段長(zhǎng)度在1.5 kb 左右，延伸時(shí)間一分半鐘，流程為95°C解鏈，55℃退火，75℃延伸，無論配50u還是25u體系都沒法P出來。。注意：我以前是可以P出來的。。。哭。。 各位大神，我最近兩個(gè)月都浪費(fèi)在上面了，無任何頭緒，求各位的意見！要不就該被逼瘋了。。。。。嗚。。。。。嗚。。。。 |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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3樓2014-08-17 10:30:49
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4樓2014-08-17 11:15:25
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5樓2014-08-17 11:24:06
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