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sakura01_22木蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白質相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之檢測不出
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| 如題,在蛋白質相互作用研究中,IP檢測,蛋白A能拉下蛋白B,但是蛋白B IP蛋白A時,檢測不出。重復3遍左右,依然檢測不出,希望哪位蟲友能幫忙解答一下。是否存在相互作用只能單方面pull-down的情況,這種情況如何解釋? |

專家顧問 (知名作家)
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專家經驗: +218 |
木蟲 (著名寫手)
至尊木蟲 (知名作家)
Translator and Proofreader
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這種情況雖然少見,但卻是可以出現的。具體到你的情況: 1、確證用A之抗體Co-IP B的真實性,具體說要有對照(同種屬的control IgG對照)。 2、另選一種或幾種B的抗體試一試。許多抗體并非適于IP實驗,這時只能另選可能用的其他抗體。 3、用其他方法驗證A-B間的相互作用(physical interaction),如GST pulldown assays等。 4、可以用mammalian two-hybrid assay在功能上(functional interaction)研究A-B間的相互作用。 Good luck! |
木蟲 (小有名氣)

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