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lilongping新蟲 (正式寫手)
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[求助]
長(zhǎng)片段克隆用invitrogen公司試劑盒問題求助 已有3人參與
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最近用PCR擴(kuò)增得到6.5k左右條帶，想做做長(zhǎng)片段PCR克隆，用Invitrogen公司的TOPO® XL PCR Cloning試劑盒做了一次克�。喊凑者@個(gè)試劑盒操作說明，片段4ul 連接1ul 載體，25℃，30min后，轉(zhuǎn)化到TOP 10 感受態(tài)，在卡拉霉素抗性平板上過夜培養(yǎng)后，生長(zhǎng)了大概有200左右的克隆，我挑取24個(gè)之后用M13F-M13R引物做菌落PCR,但是，檢測(cè)的結(jié)果非常奇怪：有很多條帶，大家看看這個(gè)是什么原因，哪里出問題了啊？ 我連接的PCR片段是條帶單一的，濃度為26ng/ul。 圖片最中間的是全式金15k的DNA分子量Marker 2014-08-17 長(zhǎng)片段克隆檢測(cè)G,H;.jpg |
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trizol11
木蟲 (正式寫手)
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lilongping
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5樓2014-08-18 22:37:54
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