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z631535213木蟲 (正式寫手)
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關(guān)于Tris-HCl緩沖液的問題 已有4人參與
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配制的Tris-HCl（0.05mol/L，25℃）若干PH區(qū)間度的緩沖液用于 病毒DNA的提取與PCR 中。 1.這個(gè)緩沖液需要滅菌嗎？要是需要滅菌，請問該怎么滅菌？高溫高壓還是還是用超濾膜？高溫高壓滅菌后會不會PH有很大的影響呢 2.Tris溶液我能不能配成母液的形式儲存，用的時(shí)候稀釋到需要的程度？ 拜謝各位蟲友。 |
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| 是的DNA提取一般是不用滅菌的，如果想滅菌可以用濕熱滅菌（tris，TES都可以），配置成母液用時(shí)稀釋，根據(jù)Henderson-Hasselbalch方程，pH不會變化，但是實(shí)際上有波動，不過影響不大。用緩沖液最重要的是注意緩沖范圍，特定溫度下查pKa，緩沖范圍在pKa±0.5 |
5樓2014-08-28 10:19:33
9樓2014-08-28 16:28:32
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無機(jī)及分析化學(xué)中學(xué)的Henderson-Hasselbalch公式加上同離子效應(yīng)，只要水中沒有其他離子干擾，緩沖液稀釋pH是不會變的，但實(shí)際中的水達(dá)不到無離子，尤其是蒸餾水，無論蒸餾多少次，水中都會殘留離子，所以稀釋以后會有波動，但是波動很小不影響使用。100×稀釋沒問題。你實(shí)在不放心就稀釋以后測測看。使用緩沖要注意緩沖范圍，比如pH8.0的Tris-HCl在4℃下就幾乎沒有緩沖能力了。 |
14樓2014-08-29 15:11:28
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