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[求助]
如何研究抗生素合成基因簇中的調(diào)控基因?qū)@個(gè)抗生素的調(diào)控作用 已有3人參與
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想研究放線菌中NRPS抗生素合成基因簇中一個(gè)未知功能的調(diào)控基因?qū)@個(gè)抗生素本身的是否有調(diào)控作用。在敲除和過表達(dá)后如果會(huì)影響抗生素的合成后。如何研究其具體機(jī)制。有人建議研究調(diào)控基因與啟動(dòng)子的互作，但是本基因簇有64ORF，是否要各個(gè)研究。如果確定了其結(jié)合的啟動(dòng)子區(qū)域，如何再進(jìn)一步研究其具體機(jī)制？ 如果換作您，您有怎樣的構(gòu)思？謝謝 |
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清風(fēng)徐來111
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
yghboy168(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-09-03 21:20:36
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yghboy168(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-09-03 21:20:36
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看來你已經(jīng)做了基因敲除和過表達(dá)了，只是不知道你基因敲除和過表達(dá)的表現(xiàn)型是什么樣子的結(jié)果，這直接關(guān)系到下一步工作。 其實(shí)最簡(jiǎn)單的就是將敲除的和過表達(dá)的菌株針對(duì)于64個(gè)ORF做一個(gè)實(shí)時(shí)定量RT-PCR，看看其對(duì)不同基因表達(dá)的影響，找出明顯影響的基因再做調(diào)節(jié)蛋白與DNA的互作應(yīng)該就初步會(huì)得出結(jié)果，再做受影響基因蛋白表達(dá)產(chǎn)物的變化。最后根據(jù)受影響蛋白的結(jié)構(gòu)分析其功能，對(duì)其功能進(jìn)行驗(yàn)證。 |
4樓2014-09-02 10:43:25
2樓2014-08-31 12:49:23
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2014-09-01 13:57:17
5樓2014-09-03 07:12:00
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6樓2014-09-03 08:54:42
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10樓2014-09-04 15:16:46
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