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[求助]
如何研究抗生素合成基因簇中的調(diào)控基因?qū)@個抗生素的調(diào)控作用 已有3人參與
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想研究放線菌中NRPS抗生素合成基因簇中一個未知功能的調(diào)控基因?qū)@個抗生素本身的是否有調(diào)控作用。在敲除和過表達后如果會影響抗生素的合成后。如何研究其具體機制。有人建議研究調(diào)控基因與啟動子的互作，但是本基因簇有64ORF，是否要各個研究。如果確定了其結(jié)合的啟動子區(qū)域，如何再進一步研究其具體機制？ 如果換作您，您有怎樣的構(gòu)思？謝謝 |
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9樓2014-09-03 19:35:27
2樓2014-08-31 12:49:23
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2014-09-01 13:57:17
【答案】應助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
yghboy168(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-09-03 21:20:36
感謝參與，應助指數(shù) +1
yghboy168(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-09-03 21:20:36
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看來你已經(jīng)做了基因敲除和過表達了，只是不知道你基因敲除和過表達的表現(xiàn)型是什么樣子的結(jié)果，這直接關系到下一步工作。 其實最簡單的就是將敲除的和過表達的菌株針對于64個ORF做一個實時定量RT-PCR，看看其對不同基因表達的影響，找出明顯影響的基因再做調(diào)節(jié)蛋白與DNA的互作應該就初步會得出結(jié)果，再做受影響基因蛋白表達產(chǎn)物的變化。最后根據(jù)受影響蛋白的結(jié)構(gòu)分析其功能，對其功能進行驗證。 |
4樓2014-09-02 10:43:25
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