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huangk1199木蟲 (正式寫手)
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[求助]
CTC,DAPI,CFDA 染色問題 已有1人參與
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剛摸索熒光顯微鏡使用,對復(fù)雜環(huán)境樣品(污泥和堆肥產(chǎn)物)染色,所有步驟均按照藥品kit的操作說明,問題求教, 1. CTC 可以染呼吸活細胞,UV 下紅色;DAPI 染活細胞+死細胞的DNA,UV燈下藍色。問題是,若一個活細胞被CTC和DAPI同時染色后,理論上在UV下發(fā)出紅色+藍色,但實際上能看到一個細胞被兩種染色劑染上嗎?如果被在UV下,低倍率觀察,一個細胞有紅+藍,這個時候的顏色又是什么顏色? 2. 理論上是CFDA染活細胞顯綠色,DAPI 染全細胞顯紅色,但是為啥經(jīng)常觀察的結(jié)果是綠色的數(shù)量大于藍色的?這個不解。 3. CFDA和DAPI混染后,DAPI的背景過重,如何處理,用PBS or 無菌水漂洗,哪個好? |

木蟲 (小有名氣)
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