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huangk1199木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
CTC,DAPI,CFDA 染色問(wèn)題 已有1人參與
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剛摸索熒光顯微鏡使用，對(duì)復(fù)雜環(huán)境樣品（污泥和堆肥產(chǎn)物）染色，所有步驟均按照藥品kit的操作說(shuō)明，問(wèn)題求教， 1. CTC 可以染呼吸活細(xì)胞，UV 下紅色；DAPI 染活細(xì)胞+死細(xì)胞的DNA，UV燈下藍(lán)色。問(wèn)題是，若一個(gè)活細(xì)胞被CTC和DAPI同時(shí)染色后，理論上在UV下發(fā)出紅色+藍(lán)色，但實(shí)際上能看到一個(gè)細(xì)胞被兩種染色劑染上嗎？如果被在UV下，低倍率觀察，一個(gè)細(xì)胞有紅+藍(lán)，這個(gè)時(shí)候的顏色又是什么顏色？ 2. 理論上是CFDA染活細(xì)胞顯綠色，DAPI 染全細(xì)胞顯紅色，但是為啥經(jīng)常觀察的結(jié)果是綠色的數(shù)量大于藍(lán)色的？這個(gè)不解。 3. CFDA和DAPI混染后，DAPI的背景過(guò)重，如何處理，用PBS or 無(wú)菌水漂洗，哪個(gè)好？ |
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xk729
木蟲(chóng) (小有名氣)
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2樓2014-09-09 18:56:50
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